R300脂質體轉染試劑

  增強型轉染試劑是在前幾代轉染試劑的基礎上再次創新，包含最為先進的脂質體納米顆粒技術，追求更優越的轉染性能。增強型轉染試劑具有更好的轉染效率，并提高細胞活性，適用于較難轉染及常見細胞的轉染。

  操作步驟：(以六孔板的貼壁細胞DNA轉染為例)

  1. 細胞準備。轉染前一天將細胞接種至六孔板內，細胞接種數量視其生長速度和細 6 胞系類型而定，一般為0.5-1×10 個細胞。轉染時要求細胞生長的匯合度為70~90%，轉 染前兩小時對細胞進行換液。(細胞狀態與轉染效果影響很大，選擇最佳的細胞狀態更有利于轉染效率提高和轉染后細胞狀態的恢復);

  2. 將3.75μl和7.5μl的RZ523-Lipo增強轉染試劑分別加至另外125μl無血清的OPTI-MEM培養基中，輕輕混勻，室溫靜置2-3分鐘;

  3. 將5μg質粒DNA (0.5-5μg/μL) 加入到250μl無血清OPTI-MEM培養基稀釋，制備DNA 預混液勻，然后添加10 μl RZ523-Lipo輔助試劑并充分混勻;

  4. 在每管已稀釋的RZ523-Lipo增強轉染試劑中加入等體積稀釋的 DNA孵育10-15分鐘;

  5.將DNA和RZ523-Lipo增強轉染試劑混合液滴加至六孔板的孔內，前后左右晃動孔板混勻，置于培養箱中培養;

  6.轉染18-48小時后，倒置熒光顯微鏡下觀察熒光蛋白表達，或加入抗性培養基篩選穩定表達細胞系單克隆。