胰酶

產(chǎn)品介紹：

組織細(xì)胞的體外培養(yǎng)和原代細(xì)胞培養(yǎng)中的組織細(xì)胞分散（將組織塊制備成單個(gè)細(xì)胞懸液）以及傳代細(xì)胞培養(yǎng)中，貼壁生長(zhǎng)細(xì)胞的消化分散均要使用組織細(xì)胞消化液。常用的消化液為胰蛋白酶，EDTA等，其功能主要是使細(xì)胞間的蛋白質(zhì)（如細(xì)胞外基質(zhì)）水解，使組織或貼壁細(xì)胞分散成單個(gè)細(xì)胞，制成細(xì)胞懸液用于進(jìn)一步的實(shí)驗(yàn)。

保存：-20℃保存，有效期12個(gè)月。

本品含 0.25%胰酶和 0.02%EDTA（0.53mM），含酚紅，溶于無鈣鎂平衡鹽溶液中，經(jīng)過濾除菌，可以直接用于培養(yǎng)細(xì)胞和組織的消化。
特點(diǎn)：
本產(chǎn)品具有方便快速、穩(wěn)定安全、性價(jià)比高，不影響細(xì)胞狀態(tài)等特點(diǎn)。

高濃度的胰蛋白酶濃度孵育細(xì)胞或過長(zhǎng)的時(shí)間周期，會(huì)損傷細(xì)胞膜并導(dǎo)致細(xì)胞死亡。原代細(xì)胞特別敏感。如果不確定使用的胰蛋白酶的濃度，使用低濃度稀釋（1:10或1:5）。

消化濃度和時(shí)間取決于細(xì)胞類型、種群。
僅用于科研研究使用，不允許人或動(dòng)物臨床醫(yī)療等應(yīng)用。

使用方法：

以下操作以貼壁細(xì)胞的消化為例：

1) 吸去培養(yǎng)液，用無菌的PBS、Hanks液或無血清培養(yǎng)液洗滌細(xì)胞一次，以去除殘余的血清。

2) 加入少量胰蛋白酶消化液，蓋過細(xì)胞即可，室溫放置1-2分鐘。不同的細(xì)胞消化時(shí)間有所不同，對(duì)于貼壁牢固的細(xì)胞可適當(dāng)延長(zhǎng)消化時(shí)間。

3) 顯微鏡下觀察，細(xì)胞明顯收縮，并且肉眼觀察培養(yǎng)器皿底部發(fā)現(xiàn)細(xì)胞的形態(tài)發(fā)生明顯的變化；或者用*吹打細(xì)胞發(fā)現(xiàn)細(xì)胞剛好可以被吹打下來。此時(shí)吸除消化液。加入含血清的細(xì)胞培養(yǎng)液，吹打下細(xì)胞，即可直接用于后續(xù)實(shí)驗(yàn)。

4) 如果發(fā)現(xiàn)消化不足，可加入胰蛋白酶消化液重新消化。

5) 如果發(fā)現(xiàn)細(xì)胞消化時(shí)間過長(zhǎng)，未及吹打細(xì)胞，細(xì)胞已經(jīng)有部分直接從培養(yǎng)器皿底部脫落，直接用胰酶細(xì)胞培養(yǎng)液把細(xì)胞全部吹打下來。1000-2000g離心1分鐘，沉淀細(xì)胞，盡量去除胰酶細(xì)胞消化液后，加入含血清的完全培養(yǎng)液重新懸浮細(xì)胞，即可用于后續(xù)實(shí)驗(yàn)。

備注：本品用于組織的消化時(shí)，不同的組織需要消化的時(shí)間相差很大，通常以消化后可以充分打散組織為宜。

注意事項(xiàng)：

1．本品長(zhǎng)期保存需放-20℃凍存，在使用前提前取出放4℃冰箱解凍，長(zhǎng)時(shí)間靜置可能會(huì)造成顏色以及成分不均勻，請(qǐng)?jiān)谑褂们皳u勻.

2 ．由于每種組織或細(xì)胞性質(zhì)不同，應(yīng)依據(jù)具體情況，確定**消化時(shí)間；消化細(xì)胞時(shí)間不宜過長(zhǎng)，否則會(huì)影響細(xì)胞貼壁和生長(zhǎng)狀況；

2．本產(chǎn)品不含抑菌劑，在使用過程中要特別注意無菌操作，避免消化液被污染；

3．解凍后液體不宜4℃長(zhǎng)期保存，盡量避免反復(fù)凍融，小量使用時(shí)建議分裝密封凍存，分裝過程請(qǐng)注意無菌操作；

4. 為了您的安全和健康，請(qǐng)?jiān)谧⒁獠僮靼踩?qǐng)穿實(shí)驗(yàn)服并戴一次性手套操作。