BCA蛋白定量試劑盒

產(chǎn)品說明：

對于微量或少量的血液樣品，可以在一步中不進(jìn)行離心棄上清的操作，直接在第二步中加入10倍血液體積的紅細(xì)胞裂解液，并在冰上裂解4-5分鐘。對于鼠的血液，裂解4-5分鐘已經(jīng)足夠，對于人的外周血，宜延長裂解時間至10分鐘，但通常不宜超過15分鐘，并且裂解過程中宜適當(dāng)偶爾搖動以促進(jìn)紅細(xì)胞裂解。后續(xù)步驟相同。蛋白質(zhì)定量是蛋白質(zhì)研究的基礎(chǔ)工作之一。BCA(bicinchoninic acid)是理想的蛋白質(zhì)定量方法;是當(dāng)前比Lowry 法更優(yōu)越的專用于檢測總蛋白質(zhì)含量的產(chǎn)品。該方法以快速靈敏、穩(wěn)定可靠，對不同種類蛋白質(zhì)檢測的變異系數(shù)非常小而倍受專業(yè)人士的青睞。BCA 法測定蛋白濃度不受絕大部分樣品中的化學(xué)物質(zhì)的影響。在組織細(xì)胞裂解實驗中，常用濃度的去垢劑SDS，Triton X-100，Tween不影響檢測結(jié)果，但受螯合劑(EDTA，EGTA)、還原劑（DTT，巰基乙醇）和脂類的影響。實驗中，若發(fā)現(xiàn)樣品稀釋液或裂解液本身背景值較高，可試用Bradford蛋白濃度測定試劑盒。
該產(chǎn)品不受此影響，因此與之配合使用，可免除您實驗中的許多煩惱。該試劑盒在31.25--2000ug/ml濃度范圍內(nèi)有較好的線性關(guān)系。

使用說明：
配制工作液: 根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)品和樣品數(shù)量，按 50 體積 BCA 試劑 A 加 1 體積 BCA 試劑 B（50:1）配
制適量 BCA 工作液，充分混勻。
2、稀釋標(biāo)準(zhǔn)品：將標(biāo)準(zhǔn)品儲存液稀釋至 31.25～2000ug/ml，推薦使用去離子水或 0.9% NaCl。
管號 稀釋液體積 標(biāo)準(zhǔn)品體積 終濃度
A 360ul 240ul(5mg/ml) 2000ug/ml
B 300ul 300ul(從 A 管取) 1000ug/ml
C 300ul 300ul(從 B 管取) 500ug/ml
D 300ul 300ul(從 C 管取) 250ug/ml
E 300ul 300ul(從 D 管取) 125ug/ml
F 300ul 300ul(從 E 管取) 62.5ug/ml
G 300ul 300ul(從 F 管取) 31.25ug/ml
H 300ul 0ul                         0ug/ml（空白）
3、 將 25ul 的標(biāo)準(zhǔn)品和合適濃度范圍的樣本（比如 5ul 樣品+20ul 稀釋液）分別添加于 96 孔板的微孔中。
4、 各孔加入 200ul BCA 工作液，充分混勻。
5、 蓋上 96 孔板蓋，37℃孵育 30 分鐘（如果濃度較低，可適當(dāng)提高孵育溫度或延長孵育時間） 。
6、 冷卻到室溫，用酶標(biāo)儀測定 A562，根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)曲線計算出蛋白濃度。